Бак посев на трихомонады в инвитро. Способы проведения диагностики трихомониаза. Подготовка к сдаче анализов

Трихомониаз передаётся половым и контактно-бытовым путём (нестерильными гинекологическими инструментами, через полотенце, купальники в саунах, бассейнах). Трихомониаз увеличивает риск заражения другими половыми инфекциями и ВИЧ.

При отсутствии лечения, трихомониаз вызывает воспалительные процессы органов малого таза, что в последующем приводит к бесплодию.

Новорождённые могут заразиться от больной матери во время беременности или родов.

Если был обнаружен трихомониаз у пациента, то следует обследовать и его полового партнера. В связи с высокой вероятностью появления инфекции снова, через 3 месяца после окончания лечения необходимо провести повторный анализ.

Клиническая картина при трихомониазе
Характерные признаки трихомониаза у мужчин: зуд и жжение при мочеиспускании, прожилки крови в сперме.

Характерные признаки трихомониаза у женщин: пенистые, жёлто-зелёные выделения с неприятным запахом, частые позывы на мочеиспускание, кровь в выделениях, покраснения и отек половых органов.

Показания:

• при симптомах воспалительных заболеваний мочеполовых органов (зуд, раздражение, жжение, пенистые, жёлто-зелёные выделения с неприятным запахом, частые позывы на мочеиспускание, кровь в выделениях);
• при наличии других ЗППП (трихомониаз часто сочетается с хламидиозом, гонореей);
• при хронических воспалительных заболеваниях мочеполовых органов;
• при планировании беременности (обследование обоих супругов);
• при бесплодии;
• при случайных половых контактах и/или множестве половых партнеров;
• при профилактических скрининговых обследованиях.

Подготовка
Исследование проводят до начала приёма противомикробных препаратов и иммуномодуляторов, а также спустя 14–21 день после окончания их приёма.

Женщины (урогенитальный мазок):

• сдача мазка не допускается в дни менструации. За трое суток до взятия необходимо отказаться от применения вагинальных свечей, тампонов, спермицидов, за сутки исключить половые контакты. Нельзя спринцеваться накануне проведения обследования. После УЗИ-исследования с применением вагинального датчика, кольпоскопии, биопсии должно пройти не менее 48 часов.

Мужчины (урогенитальный мазок):

• за 1–2 суток до взятия мазка, необходимо исключить половые контакты. Нельзя мочиться в течение 1,5–2 часов до процедуры.

Интерпретация результатов
Результат предоставляется в форме «обнаружено» или «не обнаружено».

Референтные значения: не обнаружено (отрицательно)

Причины положительного результата:

• наличие вагинальной трихомонады.

Причины отрицательного результата:

• отсутствие трихомонадной инфекции (норма).

Время на чтение: 8 мин

Посев на трихомонады – эталон диагностики трихомонадной инфекции. Это очень чувствительное исследование. Его применяют для подтверждения диагноза или, когда результаты микроскопии не выявляют возбудителя, но у больного присутствует клинические симптомы трихомониаза.

Анализ позволяет обнаружить трихомонаду vaginalis у людей с бессимптомной формой трихомониаза. Метод входит в список обязательных обследований пациентов, обратившихся к венерологу, а также их половых партнеров.

Трихомониаз и его возбудитель

Женщины восприимчивее к трихомонозу, чем мужчины из-за большей площади слизистых оболочек.

Трихомонады не способны жить вне организма человека, мгновенно погибая при высушивании, поэтому трихомониаз передается исключительно половым путем. Очень сложно заразиться трихомониазом бытовым способом. Для этого нужно использовать общее полотенце или предметы гигиены.

Симптомы инфекции

Всемирная организация здравоохранения выделяет следующие виды трихомониаза, путем присвоения инфекциям кода по МКБ 10:

• мочеполовой;
• вагинальный;
• трихомонадный простатит;
• иных локализаций;
• неуточненный.

Международный перечень не отражает многообразия вариантов инфекции, поэтому практикующие врачи пользуются другой классификацией, разделяя заболевание по степени выраженности воспалительного процесса на три формы:

• явную;
• вялотекущую;
• скрытую.

Острая форма трихомониаза лучше всего поддается диагностике, так как протекает с хорошо выраженными клиническими симптомами: зудом в половых органах, дизурией, расстройством мочеиспускания, выделениями из уретры и влагалища.

Примерно в половине случаев трихомониаз протекает скрытно, без клинических признаков. При этом больной является источником заражения своих сексуальных партнеров. Бессимптомный трихомониаз чаще развивается у мужчин.

Если трихомониаз не лечить, он переходит в хроническую форму, после чего может сохраняться в организме годами. протекает практически бессимптомно.

Заболевание сложно выявить, при этом человек является источником инфекции для здоровых людей. У пациента развивается ряд серьезных осложнений: бесплодие, опухоли простаты (у мужчин), кисты яичников (у женщин).

Диагностика заболевания

Клиническая картина

Доктор медицинских наук, профессор Гандельман Г. Ш.:

В рамках Федеральной программы, при подаче заявки до 12 октября . (включительно) каждый житель РФ и СНГ может получить одну упаковку Toximin БЕСПЛАТНО!

Обнаружение простейших в биоматериале пациента – необходимый этап диагностики урогенитального трихомониаза.

Так как клинические признаки трихомонадной инфекции могут быть слабовыраженными или вовсе отсутствовать, для отражения реальной картины заболевания используют лабораторные методы диагностики.

Виды анализов

В настоящее время используются четыре лабораторных метода выявления трихомониаза:

• изучение непосредственно биоматериала;
• чистая культура;
• изучение иммунного ответа;
• генный.

Микроскопивание

Микроскопический метод состоит в исследовании мазка под увеличением. Трихомонад можно обнаружить в нативном и окрашенном мазке.

Нативные мазки рассматривают сразу же после отбора биоматериала – покинув организм человека трихомонады уже через несколько минут теряют способность передвигаться и становится малозаметными в окуляре микроскопа.

При окрашивании препарата метиленовым синим или по Грамму трихомонады погибают. В таких в препаратах простейших обнаруживают не по их характерным движениям, а по форме и строению. Трихомонады обладают правильно очерченным асимметричным ядром, окрашенным в препарате более ярко, чем цитоплазма.

Чтобы были видны жгутики и мембрана препарат окрашивают по Романовскому-Гимзе или Лейшману. Чувствительность микроскопирования доходит до 82 %.

Микроскопический метод экономически наиболее целесообразен, но с учетом низкой надежности доверять ему на 100% не стоит.

Иммунологические тесты

Иммунологические методы – прямой иммуноферментный/иммунофлюоресцентный анализ вагинального соскоба – высокоточный метод диагностики. К его преимуществу относится скорость – диагноз можно поставить в течение одного часа.

Прямой иммуноферментный анализ (direct elisa) возможен в результате развития клеточных технологий и других высокотехнологичных дисциплин. Сейчас производятся готовые наборы для иммуноферментной диагностики, которые поставляются в лаборатории и лечебно-профилактические учреждения. Они повышают точность диагностики.

В прямом иммуноферментном анализе используются антитела к выявляемому антигену. Биологический материал, который предстоит исследовать на наличие трихомонад, помещают в специальные лунки на 15-30 минут. Далее к биоматериалу добавляют антитела, полученные промышленным способом.

Смесь выдерживают 15 часов. За это время антитела находят свои антигены. Если в пробе нет антигенов, антитела останутся свободными.

На втором этапе проводят ферментативную реакцию. В лунки добавляют ферменты и ждут 30-60 минут. Фермент окрашивает комплексы антитело-антиген, после чего методом калориметрии находят концентрацию окрашенного вещества в неокрашенном.

Таким образом иммуноферментный анализ отвечает на вопрос, какова концентрация trichomonas vaginalis в миллилитре биоматериала.

Полимеразная цепная реакция

Генодиагностические технологии широко внедрились в лабораторную практику в девяностых годах прошлого века. Полимеразная цепная реакция позволяет найти возбудителя инфекции в любом биоматериале: крови, моче, соскобах, слюне. Для выявления трихомониаза исследуют слизистые оболочки.

ПЦР называют мазком на скрытые инфекции. Диагностика дает очень точный результат, позволяет идентифицировать род и вид микроорганизма. Таким образом лечение может быть максимально эффективным. Метод выявляет микроорганизмы, даже если их немного. Благодаря ему трихомониаз можно диагностировать на начальном этапе развития и быстро излечить.

Принцип ПЦР исследования:

• в лаборатории размножают участок ДНК;
• когда молекула вырастает до нужного размера, определяют с каким видом микроорганизма лаборант имеет дело.

Что такое бакпосев?

Новейшие методы диагностики (ИФА, ПЦР и др.) позволяют идентифицировать возбудителя, но не решают задачу подбора препарата направленного действия. Выращивание чистой культуры позволяет обнаружить простейших в организме человека и изучить влияние на них различных лекарственных средств.

Посев – это внесение биологических материалов на питательную среду для культивирования содержащихся в мазке микроорганизмов. После выдержки в течении нескольких дней в термостате проводят образовавшиеся колонии микроскопируют.

Выращивание трихомонад в бульонной культуре – это «золотой стандарт» диагностики. Способ позволяет обнаружить трихомонад в количестве 300-500 экземпляров в одном миллилитре биологического материала.

Его недостатки – высокая стоимость анализа и продолжительность исследования. За сколько дней делается бакпосев? Для диагностики потребуется от 5 до 7 дней .

Трихомониаз высоко заразен, поэтому человек, диагноз которого еще только подтверждается, ко дню, когда будут готовы результаты бакпосева, может заразить несколько половых партнеров.

В связи с этим метод выращивания трихомонад в культуре не получил широкого применения в качестве прямого диагностического метода, а используется как вспомогательный, когда инфекция не поддается другим способам диагностики.

Достоинства метода:

• невозможен ложноположительный результат;
• очень высокая специфичность и чувствительность к возбудителю.

Недостатки исследования:

• длительность;
• высокие требования к квалификации персонала;
• строгие правила забора и обработки биологического материала;
• невозможность автоматизации.

Для размножения трихомонад используют жидкие или твердые питательные среды, обязательными компонентами которых являются яичный белок, сыворотка крови, аминокислоты, витамины и другие вещества.

Цели исследования

Целью посева является получение большого количества микробов одного вида. В большинстве случаев трихомониаз протекает совместно с другими инфекциями мочеполовых путей, в частности, . Метод культурального посева позволяет обнаружить трихомониаз и сопутствующие инфекции: стрептококки, стафилококки, в том числе золотистый.

Достоверность культуральной диагностики трихомониаза напрямую зависит от качества питательной среды. За рубежом для культивирования трихомонад используют среду СPLM.

В восьмидесятых годах прошлого века российские ученые разработали усовершенствованную среду СPLM в состав которой входили:

• гидролизат казеина;
• гидролизин;
• аминопептид;
• отходы фармацевтики;
• ферменты биомассы микроорганизмов;
• кормовые дрожжи.

Современные отечественные питательные среды состоят из:

• белкового порошка;
• калиевая соль;
• кальциевая соль;
• натрия двууглекислого;
• аскорбиновой и лимонной кислот;
• оротовой кислоты;
• лактата;
• мальтозы.

Смесь стерилизуют, охлаждают, вносят лошадиную сыворотку и антибиотики. Для размножения простейших особенно важна лошадиная плазма. В ней есть все необходимое для жизнедеятельности трихомонад: липиды, жирные кислоты, аминокислоты, следы металлов.

В настоящее время выпускаются готовые питательные среды коммерческого назначения, которые поступают в отечественные лаборатории:

• субстрат для выявления влагалищных трихомонад (Омск);
• основа пительного субстрата (НПО Микроген, Махачкала);
• SBT для визуальной диагностики влагалищных трихомонад (Санкт-Петербург).

В каких случаях назначается анализ?

Выращивание культур – надежный, но дорогой и неудобный способ. Между тем он широко используется. Подавляющее число больных трихомониазом – до 73% среди пациентов обоих полов – выявляют с помощью культурального метода.

Как сдавать анализы на трихомониаз? Существуют стандартный алгоритм обследования пациента с подозрением на трихомониаз:

1. Бакпосев назначают после физического осмотра больного и исследования его нативного мазка.
2. Если мазок отрицательный, проводят тест на скоростное определение антигена, позволяющий получить результат в течение нескольких часов.
3. Если и в этом случае результат отрицательный – используют культивирование.

О диагностике трихомониаза в видео:

Таким образом культивированию предшествует ряд более скоростных, но достаточно информативных тестов, позволяющих выявить трихомониаз быстрее, чем многодневное выращивание колоний в термостате.

Общая информация о лечении заражения

Препаратом выбора для лечения трихомониаза является Метронидазол. Вещество входит в группу 5 нитроимидазола, обладает антибактериальной и противопротозойной активностью.

Врач-гинеколог просвещает об анализах в гинекологии:

Метронидазол активен в отношении trichomonas vaginalis, амеб и ряда других патогенных микроорганизмов, что позволяет использовать его в сочетании с антибиотиками для лечения смешанных мочеполовых инфекций. Препарат несовместим с алкоголем.

Аналоги Метронидазола: Тинидазол , Секнидазол , Тернидазол и другие препараты из группы 5-нитроимидазолов.

Для лечения трихомониаза Метронидазолом используют следующие схемы:

• по 250 г утром и вечером в течение 10 дней;
• по 400 мг 2 р. в сутки 5-8 дней.

Женщинам назначают Метронидазол дополнительно в виде вагинальных свечей или таблеток.

Несмотря на высокий уровень опасности трихомониаза, возможность инфицирования все еще остается актуальной для многих жителей планеты. Неразборчивость в половых связях и незащищенный секс приводят к заражению, и только своевременная диагностика трихомониаза способна определить инфекцию до того, как она начнет свое разрушительное воздействие.

Сколько и какие виды лабораторных исследований применяют для постановки диагноза и как проходит обследование – читайте в нашей публикации.

Показания к исследованиям

Трихомониаз – инфекция половых органов, вызываемая простейшим возбудителем трихомонадой. В результате заражения половым путем трихомонады заселяют слизистую органов мочеполовой системы. В процессе развития патогенные клетки поражают эпителий, провоцируя множественные воспалительные процессы.

Если в этот период обнаружить трихомониаз с помощью анализов, то можно остановить заболевание и не допустить появления осложнений. Если же игнорировать признаки активности трихомонады, патогенные клетки продолжат развитие, сохраняя способность зараженного человека передавать инфекцию здоровым половым партнерам.

Необходимость диагностировать трихомониаз у женщин обычно вызвана появлением характерных симптомов инфекции:

• Покраснения тканей влагалища и шейки матки.
• Образования красных гранулем в шеечной области.
• Отек и гиперемирование тканей мочеиспускательного канала.
• Наличие эрозийных образований на слизистой органов мочеполовой сферы.

У мужчин трихомониаз проявляется редко – в виде гнойных выделений из уретры и покраснения тканей половых органов. Чтобы обнаружить трихомониаз у мужчин, применяют многократную диагностику высокочувствительными методами.

При первом посещении пациента врач выполняет диагностический осмотр половых органов и проводит сбор анамнеза для постановки предварительного диагноза. Дополнительно в ходе осмотра выясняется степень упорядоченности половой жизни пациента, наличие незащищенных половых актов, уровень проявления клинических симптомов заболевания.

Чтобы подтвердить или опровергнуть предварительный диагноз, пациенту необходимо пройти обследование – нужно сдать анализы. Расшифровка проведенных исследований позволит не только определиться с диагнозом, но и назначить препараты, к которым у возбудителя инфекции нет резистентности.

Существует ряд исследований при диагностике трихомониаза.

Будьте осторожны

У женщин : боли и воспаление яичников. Развиваются фиброма, миома, фиброзно-кистозная мастопатия, воспаление надпочечников, мочевого пузыря и почек.

Хотите знать что делать? Для начала советуем

Виды диагностических исследований

Наиболее эффективными считаются следующие виды лабораторных исследований: анализ мочи, бактериальный посев на трихомониаз, анализ крови, метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Бактериальный посев (мазок)

Анализ, в ходе которого берется биоматериал пациента и изучается под микроскопом на предмет выявления патогенных клеток, – это посев на трихомонады. Такое исследование в обязательном порядке проводится у всех пациентов:

• С симптомами трихомониаза.
• При наличии воспалительных процессов в мочеполовой сфере.
• При планировании беременности.

Объектом изучения при бакпосеве становятся образцы выделений из половых органов – у женщин биоматериал берут с задней стенки влагалища и канала шейки матки, у мужчин – из уретры. Забор материала при бакпосеве на возбудителя трихомониаза осуществляет врач-венеролог.

Перед проведением процедуры назначают мероприятия, провоцирующие обострение реакции трихомонады.

Биоматериал, полученный с помощью мазка на возбудителя трихомониаза, помещают в специальную питательную среду, способствующую размножению микроорганизмов. Затем выполняют нативный мазок, размещая неокрашенную каплю биоматериала в теплый раствор хлорида натрия под предметным стеклом микроскопа. Таким образом устанавливается наличие трихомонады в мазке.

Расшифровка анализа означает следующее: положительный результат – трихомониаз, отрицательный – отсутствие инфекции.

Существует порядок проведения исследований.

Если результат анализа на трихомониаз с помощью мазка показал положительную реакцию, вероятность ошибки исключается. При отрицательном результате проводят повторную – контрольную – сдачу анализа. Если до сдачи анализа проводилось антибактериальное лечение, результаты исследования могут быть искажены и не соответствовать действительности.

Несмотря на высокую точность исследования на трихомониаз, такая диагностика имеет существенный минус – обработка биоматериала и ожидание результатов занимают много времени.

Другие виды анализов

ПЦР – полимеразная цепная реакция

К числу наиболее точных диагностических методов относится ПЦР на трихомонады. Особенно важно, что с помощью этого исследования можно:

• Установить даже скрытую форму течения болезни.
• Обнаружить сопутствующие инфекции.
• Контролировать процесс лечения заболевания.
• Выбрать оптимальные лекарственные препараты.

Для получения диагностических сведений сдается моча или семенная жидкость. В лаборатории полученный биоматериал исследуют методом распознавания и многократного синтеза копий ДНК.

Расшифровка анализа: положительный результат означает констатацию трихомониаза, отрицательный – отсутствие инфекции. Результаты процедуры можно получить уже наследующий день.

Исследование крови

Дополнительную информацию о наличии инфекции и состоянии здоровья пациента позволяет получить анализ крови на антитела к трихомонаде (ИФА – иммуноферментный анализ). Антитела – иммуноглобулины различного типа – образуются в крови как ответ иммунной системы на возбудителя инфекции.

При остром течении трихомониаза это иммуноглобулины G, при хронической или бессимптомной форме болезни – иммуноглобулины M. Исследование позволяет установить наличие и тип иммунных тел и диагностировать заболевание.

Дополнительно в ходе диагностики назначают анализ крови.

Если расшифровка анализа показала наличие Ig G и IgM, то это подтверждает наличие возбудителя или свидетельствует о его недавнем присутствии. В норме данных антител в крови быть не должно.

Данный анализ на трихомониаз не считается точным, так как при скрытой форме течения болезни малоэффективен.

Сдавать кровь следует утром натощак. Учитывая, что кровь на ИФА будут брать из вены, перед процедурой не стоит принимать антибиотики. Кроме того, рекомендуется ограничить посещение туалета за 3 часа до анализа.

Любые диагностические мероприятия способны обеспечить наибольшую эффективность только при комплексном проведении.

От данных, полученных при исследовании, зависят не только постановка диагноза, но и способ лечения и его результат. Качественная диагностика – залог успешного выздоровления.

Бакпосев на трихомонады - то есть, бактериологический посев специфичных культур, это лабораторный анализ, для проведения которого у больного берется биоматериал, который затем помещается в необходимую культурную среду, с целью размножения патогенных бактерий. Это исследование предназначено для определения инфекционных агентов трихомониаза в гинекологии, венерологии и урологии.

Специфика бактериального посева как культурального анализа

Правильно сделать посев на трихомонады можно только при условии строгого соблюдения установленных режимов температуры. И только после этого лаборантом определяется чувствительность микроорганизма к определенным группам антибиотиков, как, впрочем, и к остальным антибактериальным препаратам.

Материалом для бакпосева при трихомониазе могут служить моча, кровь, мокрота, слизистое отделяемое уретрального канала, секрет простаты, сыворотка крови, кровь, плазма, паталогические жидкости воспалений, соскоб эпителия и прочие биоптаты.

Посев на трихомониаз является одним из основных необходимых анализов , поскольку способен не только обнаружить инфекционные микроорганизмы, но и так же выявить их активность, способность к репликации, количество и резистентность к лекарственным средствам. Именно диагностирование резистентного порога делает бакпосев таким незаменимым в борьбе с трихомонадой, поскольку это единственный способ правильно подобрать и назначить антибиотики для терапии различных видов и штаммов болезни, а так же для лечения смешанных инфекций.

Бак посев на трихомониаз эффективен как в отношении острой формы заболевания, так и в отношении хронической или латентной. Ориентируясь на результаты антибиотикограммы специалист назначает необходимое медикаментозное лечение и сопутствующие профилактические мероприятия.

Правила, недостатки и результаты бактериологического исследования на трихомониаз

Общие правила сдачи анализа «бакпосев на трихомониаз»:

• За несколько суток до посева больной должен полностью исключить из рациона алкоголь и любые продукты провоцирующие брожение в толстом кишечнике, например, огурцы, редьку, репу, хлеб и капусту.
• За 24 часа до сдачи биологического материала прекратить использование любых вагинальных свечей и отказаться от спринцевания.
• Прекратить прием всех назначенных антибактериальных и иммуностимулирующих препаратов как минимум за сутки до назначенного времени бакпосева.
• Отказаться от половой жизни не менее чем за двое суток до процедуры сдачи.
• Непосредственно перед забором биоматериала для посева запрещается мочиться, желательно не посещать туалет в течение двух-трех часов до процедуры.

Хотя бак посев на трихомонады обладает очень высокой специфичностью и чувствительностью к возбудителю, у него все же есть свои существенные недостатки. К ним можно отнести длительность проведения исследования и необходимое для получения результатов время. А так же высокие требования к квалификации персонала лаборатории и очень строгие правила при заборе необходимого биологического материала.
Автоматизировать процедуру не представляется возможным.

Ложноположительных результатов посев на трихомонады дать не может. При подозрении на бессимптомное носительство и отсутствии явных симптомов заболевания врач может порекомендовать подкрепить проведенное исследование результатами других анализов, например, полимеразно цепную реакцию или ИФА. В любом случае, при подозрении на инфекцию совсем не лишним будет обратиться к специалисту-венерологу.

03 фев 2014, 13:57

Диагностика трихомониаза
В данный момент клиническая картина многих инфекций, которые передаются половым путем, характеризуется малосимптомностью, отсутствием явных признаков заболевания и...