Laboratoriumdiagnostiek voor ziekten van het bewegingsapparaat en bindweefsel. Samenvatting: Totaal eiwit, de betekenis ervan en bepalingsmethoden Diagnostische waarde van het bepalen van glycoproteïnen

Eiwitten geassocieerd met koolhydraatgroepen vormen een grote klasse verbindingen, waarin twee grote groepen worden onderscheiden:

1. Glycoproteïnen zijn eiwitten die een kleine hoeveelheid koolhydraten (tot 15%) bevatten als een prothetische groep, verbonden aan aminozuurradicalen door covalente bindingen. Het koolhydraatgedeelte bevat hexosen (galactose, mannose, zelden glucose), pentosen (xylose, arabinose), deoxysuikers (fucose, rhamnose), aminosuikers (acetylgalactosamine, acetylglucosamine), neuraminezuur en zijn azijnzuuresters (siaalzuren). De meeste van deze eiwitten hebben milde zure eigenschappen. De groep glycoproteïnen omvat seromucoïden (seroglycoïden), die uitgesproken zure eigenschappen hebben en oplosbaar zijn in perchloor-, trichloorazijn- en sulfosalicylzuren. Deze fractie, die 1% van alle serumeiwitten uitmaakt, omvat 12% van alle plasmakoolhydraten.

2. Proteoglycanen (mucopolysachariden) zijn hydrofiele verbindingen, die 20-80% koolhydraten bevatten. De koolhydraatcomponenten van proteoglycanen worden glycosaminoglycanen genoemd. Er zijn 7 soorten glycosaminoglycanen, waarvan 5 soorten glucuronzuur bevatten (deze omvatten hyaluronzuur, chondroïtine-4-sulfaat en chondroïtine-6-sulfaat, heparine en heparansulfaat), het zesde type (dermatansulfaat) bevat iduronzuur (galacturonzuur). zuur , de zevende (keratansulfaat) - galactose. Siaalzuren, mannose en xylose zijn in minimale hoeveelheden aanwezig. Proteoglycanen hebben sterk zure eigenschappen vanwege de aanwezigheid van een groot aantal carboxylgroepen en zwavelzuurresiduen.

Bij het bestuderen van het gehalte aan koolhydraatbevattende eiwitten is het mogelijk om verschillende methodologische benaderingen te gebruiken:

1. Bepaling van individuele glycoproteïnen in de acute fase met behulp van specifieke enzymatische of immunologisch methoden.

2. Identificatie van rijke glycoproteïnen elektroforetisch facties.

3. Studie van koolhydraat-eiwitcomplexen op basis van hun eiwitdeel ( turbidimetrisch En nefelometrisch methoden, volgens proteïnetyrosine).

4. Bepaling van de hoeveelheid koolhydraten geassocieerd met eiwitten. De methoden van deze groep zijn het meest geschikt voor biochemische laboratoria. Alle koolhydraatcomponenten kunnen in het bloed worden bepaald, maar de bepaling van siaalzuren en eiwitgebonden hexosen is eenvoudiger en goedkoper:

• de totale hoeveelheid hexosen geassocieerd met het eiwit komt overeen met het gehalte aan glycoproteïnen, en de hoeveelheid zwavelglycoïden wordt bepaald door de concentratie van hexosen die oplosbaar zijn in perchloorzuur en onoplosbaar in fosfowolfraamzuur:

• Bij het bestuderen van het niveau van proteoglycanen wordt de koolhydraatcomponent neergeslagen met quaternaire aminen, in het bijzonder cetyltrimethylammonium, waarna glycosaminoglycanen worden bepaald door een specifieke reactie:

Het kleurverschil na de carbazool- en orcinereacties stelt ons in staat het relatieve gehalte aan dermatansulfaat in het monster te beoordelen. Voor een zuiver monster dermataansulfaat is de verhouding tussen het glycosaminoglycaangehalte door de carbazoolreactie en de concentratie ervan, bepaald door de orcinereactie, 0,67. In aanwezigheid van andere glycosaminoglycanen (behalve keratansulfaat) neemt de coëfficiënt toe.

Als Verenigd De resorcinolmethode voor het bepalen van de concentratie siaalzuren en de orcinmethode voor het bepalen van alle hexosen in glycoproteïnen en hexosen geassocieerd met zwavelglycoïden zijn goedgekeurd.

Resorcinolmethode voor het bepalen van de concentratie
siaalzuren (volgens Svennerholm)

Beginsel

Wanneer plasmaglycoproteïnen worden verwarmd met trichloorazijnzuur, worden siaalzuren afgesplitst, die op hun beurt worden gehydrolyseerd om neuraminezuur te vormen. Resorcinol geeft in aanwezigheid van koperzouten in een zoutzuuroplossing een blauwe kleur met neuraminezuur.

Normale waarden

De concentratie van siaalzuren in het bloed neemt toe tijdens verschillende ontstekingsprocessen (endocarditis, osteomyelitis), bij tuberculose, leukemie, lymfogranulomatose, nefrose, neemt sterk toe bij een hersentumor, hartinfarct, neemt toe bij schade aan het leverparenchym, collagenose en andere processen die optreden bij vernietiging van bindweefsel.

Een verlaging van de serumspiegel van siaalzuren wordt waargenomen bij patiënten met pernicieuze anemie, hemochromatose, de ziekte van Wilson en degeneratieve processen in het centrale zenuwstelsel.

Bepaling van het gehalte aan seromucoïden en het totaal
hoeveelheid glycoproteïnen met behulp van de Orcin-methode

Beginsel

Glycoproteïnen worden samen met serum- of bloedplasma-eiwitten met alcohol neergeslagen, het neerslag wordt gewassen, opgelost in alkali en na hydrolyse met zwavelzuur wordt de concentratie van hexosen bepaald door reactie met orcine, wat overeenkomt met het gehalte aan glycoproteïnen.

Om seromucoïden te bepalen, worden eiwitten neergeslagen met perchloorzuur, maar seromucoïden worden niet neergeslagen. Vervolgens worden seromucoïden uit de bovenstaande vloeistof neergeslagen met behulp van fosfowolfraamzuur, het neerslag wordt gewassen en, na het in alkali op te lossen, wordt het gehalte aan hexosen bepaald.

Normale waarden

Klinische en diagnostische waarde

De hoeveelheid hexose-glycoproteïnen neemt toe bij verschillende ontstekingsprocessen: tuberculose, pleuritis, longontsteking, acute reuma, glomerulonefritis, diabetes, hartinfarct, jicht, kwaadaardige neoplasmata. Het bepalen van de concentratie van glycoproteïnen is van bijzonder belang bij gevallen van indolente ziekten, terwijl een toename van de activiteit duidt op activering van het proces, hoewel klinische symptomen mogelijk nog niet optreden.

Een toename van het gehalte aan seromucoïde hexosen wordt waargenomen bij alle inflammatoire en necrobiotische processen: hartinfarct, kwaadaardige tumoren, chronische cholecystitis, destructieve longtuberculose, reuma.

Een afname van de indicatoren wordt gedetecteerd bij infectieuze hepatitis, hepatocellulaire dystrofie en multiple sclerose.

Geglycosyleerde hemoglobine

Hemoglobine ondergaat, net als andere eiwitten, wanneer het in een oplossing van glucose of een ander reducerend monosacharide wordt bewaard, niet-enzymatische glycosylatie, dat wil zeggen dat het een koolhydraat aan zijn structuur hecht onder de vorming van Schiff-basen. De mate van glycosylatie van hemoglobine komt rechtstreeks overeen met de incubatietijd en de glucoseconcentratie in het medium. Het gehalte aan geglycosyleerd hemoglobine (aangeduid als HbA 1c) karakteriseert dus het gemiddelde niveau van de glucoseconcentratie in het bloed gedurende 4-6 weken, dat wil zeggen gedurende een periode die evenredig is met de levensduur van het hemoglobinemolecuul (de halfwaardetijd is 90 minuten). -100 dagen).

De volgende normale soorten hemoglobine worden onderscheiden: Een 1(maakt 96-98% uit van de totale eiwitpool), Een 2 (2‑5%), Een 3 (<1%), F(1-2%). Hemoglobine A 1 bestaat uit drie componenten: HbA 1a, HbA 1b en HbA 1c. De laatste component is geglycosyleerde hemoglobine en geeft een sterke correlatie met de mate van diabetes mellitus.

1. Chromatografisch- het meest nauwkeurig, maar arbeidsintensief en vereist speciaal glaswerk en reagentia.

2. Elektroforetisch- er worden verschillende media gebruikt.

3. Chemische methoden waarbij gebruik wordt gemaakt van hydrolyse van de binding tussen het eiwit en het monosacharideresidu.

Bepaling van het niveau van geglycosyleerd hemoglobine
door reactie met thiobarbituurzuur

Beginsel

Normale waarden

Serum

4,5‑6,1%

Klinische en diagnostische waarde

Het niveau van geglycosyleerde hemoglobine neemt toe bij diabetes mellitus en karakteriseert de effectiviteit van de therapie. Tegelijkertijd duidt een stijging van de concentratie van HbA 1c tot 8-10% op goed gecompenseerde diabetes, tot 10-12% - gedeeltelijk gecompenseerd, en ruim 12% - niet-gecompenseerde diabetes mellitus.

Een afname van de indicator wordt waargenomen tijdens bloedregeneratie na bloedverlies.

• < Назад

1. Een verhoging van het bloed(serum) [enzym] wordt (hyper/enzym/emie) genoemd. Als dit enzym zich normaal gesproken in cellen bevindt, is hyper/enzym/emie het vaakst aanwezig teken van vernietiging cellen. Beschikbaarheid enzym in het bloed bepaald door de snelheid van de chemische reactie die door dit enzym wordt gekatalyseerd – wanneer het substraat van dit enzym aan het testserum wordt toegevoegd (“in vitro”). Met andere woorden: het [enzym] in het serum wordt beoordeeld per activiteit enzym.

№	Enzym (enzym)	Ziekte
1.	Amylase in urine (komt via bloed in de urine terecht)	Pancreatitis Pancreatitis
2.	Lipase
3.	Amylase in het bloed	Pancreatitis (samen met urinelipase en amylase) of de bof
4.	Creatinekinase (CK)	Infarct of pathologie van skeletspieren
5.	LDH 1	In far c t (bij angina is er geen toename van LDH)
6.	LDH 5	Pathologie van de lever (levergeelzucht) of skeletspieren
7.	AlAT is groter dan AST	Leverpathologie (hepatitis, enz.; levergeelzucht)
8.	AST is groter dan ALT	Hartaanval (of ernstige vernietiging van hepatocyten: met vernietiging van hun mitochondriën)
9.	Alkalische fosfatase (ALP)	Rachitis of andere botpathologie (indien zonder GGT) of obstructieve geelzucht (indien samen met GGT)
	Gammaglutamyl/transferase (GGT)	Alcoholisme (indien zonder ALP) of obstructieve geelzucht (indien met ALP)

In sommige gevallen is het voor het stellen van een diagnose noodzakelijk om de activiteit van niet één enzym, maar van twee te bepalen.

15. Glucosurie, de oorzaken ervan en de diagnostische betekenis.

Prima glucose heel weinig in de urine (< 0,5 г/сутки, или < 0,16 г/л), что не определяется обычными методами. Глюкозурией считают наличие в моче glucose, die wordt gedetecteerd door een standaardspecifieke test. Glucosurie ontstaat in gevallen waarin de inhoud glucose in plasma bloed en daarom overtreft het glomerulaire filtraat aanzienlijk de reabsorptiecapaciteit van de niertubuli.

Dit gebeurt bij elke promotie. bloed glucose, vooral als gevolg van de snelle absorptie glucose in de darmen (post-gastro-ectomie-dumpingsyndroom, normale zwangerschap); voor endocriene ziekten (DM, thyreotoxicose, gigantisme, acromegalie, Cushing-syndroom, bijnierhyperplasie); voor groot trauma, verlamming, myocardinfarct, orale toediening van corticosteroïden, brandwonden, infectie, feochromocytoom.

Renale glycosurie wordt waargenomen met schade en verhoogde permeabiliteit van de niertubuli, tubulopathieën (ziekte van Fanconi), die gepaard gaat met een toename van urineuraten, eiwitten, aminozuren, bicarbonaten, fosfaten, calcium en kalium. Glucosurie is aanwezig bij nierdiabetes (mutatie van de monosacharidetransporter en verminderde reabsorptie), secundaire nierglucosurie en chronische nierziekte. Bij patiënten met diabetes kan de concentratie glucose in de urine kan variëren van 0,5 tot 12%. Het verdwijnen van glucosurie bij patiënten die langdurig aan diabetes mellitus lijden, is een gevolg van aanvullend nierfalen.

Glucosurie kan worden gesimuleerd door lactosurie bij vrouwen die borstvoeding geven, fructosurie en galactosurie bij erfelijke ziekten van het koolhydraatmetabolisme. Glucosurie treedt op tijdens vergiftiging met morfine, strychnine, chloroform en fosfor.

16. De waarde van het bepalen van Ca 2+ en fosfaat in bloedserum.

Calciumnorm bloed 2,1 -2,6 mmol/l. Niveaus boven 3,5-3,75 zijn levensbedreigend crisis, plotselinge hartstilstand.

Fosfaatgehalte 0,8- 1 0,4 mmol/l.

1. Definitie waarde CAL C I A EN P H O S F A T A in bloedserum.

Veranderingen in [calcium] en [fosfaat] in bloedserum: ten eerste zijn dat gevolg bepaalde stoornissen en wijzen dus op de aanwezigheid van deze stoornissen. Ten tweede kunnen ze bepaalde aandoeningen veroorzaken en daarmee wijzen op het risico op het ontwikkelen van deze aandoeningen.

Redenen voor veranderingen in calcium- en fosfaatconcentraties: 1) slechte voeding(overmatige of onvoldoende inname van calcium en fosfaat en voedsel), 2) ontregeling en [fosfaat], veroorzaakt door verstoringen in de productie van hormonen die en [fosfaat] reguleren.

Bij onvoldoende inname van calcium en fosfaat uit de voeding kan [fosfaat] in het plasma afnemen, maar niet significant, omdat calcium en fosfaat vanuit de botten het plasma binnenkomen (als [fosfaat] in het plasma ook afneemt - maar dit gebeurt onder invloed van de hormonen calcitriol en parathyrine en het is hun tekort dat tot een afname kan leiden

17. biochemische diagnose van pancreatitis.

Biochemische bloedtest - detectie van verhoogde niveaus van amylase-enzymen Uitleg: amylase wordt geproduceerd door de alvleesklier en de speekselklieren, van waaruit het het spijsverteringskanaal binnenkomt via kanalen voor de spijsvertering (om voedselzetmeel te verteren: zetmeel afbreken tot maltose)) - amylase. vanuit de pancreas komt de twaalfvingerige darm binnen en de speekselklieren van amylase komen de mondholte binnen. Amylase mag niet in het bloed aanwezig zijn en de aanwezigheid van amylase in het bloed is het gevolg van schade aan het maagdarmkanaal of de pancreas. Alleen pancreasamylase kan in de urine terechtkomen (als het in het bloed zit), maar SG-amylase kan niet in de urine terechtkomen. Lipase wordt geproduceerd in de pancreas, maar niet in de klier. Een persoon heeft het over α -amylase. Mensen hebben geen β-amylase, omdat dit de amylase is waarmee iemand op dezelfde manier papier kan eten als brood. Deze amylase breekt β-glycosidische bindingen in cellulose af. α-amylase katalyseert de splitsing van maltose uit zetmeel of glycogeen in voedsel

Gerelateerde informatie.

Laboratoriumdiagnostiek

Laboratoriumdiagnostiek systemische laesies van bindweefsel zijn voornamelijk gericht op het bepalen van de activiteit van ontstekings- en destructieve processen daarin. De activiteit van het pathologische proces bij deze systemische ziekten leidt tot veranderingen in de inhoud en kwalitatieve samenstelling van serumeiwitten.

Bepaling van glycoproteïnen. Glycoproteïnen (glycoproteïnen) zijn biopolymeren die bestaan ​​uit eiwit- en koolhydraatcomponenten. Glycoproteïnen maken deel uit van het celmembraan en circuleren in het bloed als transportmoleculen (transferrine, ceruloplasmine omvatten enkele hormonen, enzymen en immunoglobulinen).

Indicatief (hoewel verre van specifiek) voor de actieve fase van het reumatische proces is dat wel bepaling van het seromucoïde eiwitgehalte in het bloed, dat verschillende mucoproteïnen bevat. Het totale gehalte aan seromucoïde wordt bepaald door de eiwitcomponent (biureetmethode); het is 0,75 ± 0,025 g/l. Nu is het niet alleen mogelijk om het totale gehalte aan seromucoïde te bepalen, maar ook om het te fractioneren. Momenteel zijn er dus 9 individuele eiwitten geïdentificeerd die deel uitmaken van de seromucoïde. Seromucoïde bloedeiwitten omvatten haptoglobine, dat deel uitmaakt van de α2-globulinefractie. Haptoglobine heeft het vermogen om te combineren met hemoglobine. In dit geval wordt het haptoglobine-hemoglobinecomplex geabsorbeerd door het macrofaagsysteem (mononucleair fagocytensysteem) en voorkomt daardoor het verlies van ijzer tijdens de vernietiging van rode bloedcellen. Normaal gesproken bedraagt ​​het haptoglobinegehalte 1,0 ± 0,032 g/l. In de acute fase van diffuse bindweefselziekten wordt een sterke toename van het gehalte aan dit eiwit waargenomen in verhouding tot de activiteit en omvang van het proces. Dit is een meer permanent diagnostisch teken dan bijvoorbeeld een toename van de ESR. Elektroforesemethoden worden gebruikt om haptoglobine te kwantificeren. Momenteel zijn er verschillende varianten van haptoglobine ontdekt, maar het is niet mogelijk om de overheersing van een of ander type haptoglobine bij patiënten met reumatische aandoeningen te vinden. De detectie van een koperhoudend bloedglycoproteïne, ceruloplasmine, in het bloed van patiënten met reumatische aandoeningen heeft een zekere diagnostische betekenis. Ceruloplasmine is een transporteiwit dat koper in het bloed bindt en behoort tot de α2-globulinen. Ceruloplasmine wordt bepaald in eiwitvrij serum met behulp van parafenyldiamine. Normaal gesproken bedraagt ​​het gehalte 0,2-0,05 g/l; tijdens de actieve fase van het ontstekingsproces neemt het niveau ervan in het bloedserum toe. De ontstekingsactiviteit bij diffuse bindweefselziekten kan niet alleen worden beoordeeld aan de hand van de concentratie van eiwitcomponenten in bloedserum, maar ook aan de hand van het gehalte aan koolhydraatcomponenten van glycoproteïnen, waaronder hexosen (D-galactose, D-mannose, D-glucose ), pentosen (D-xylose, L-arabinose), deoxysuikers (L-fructose, L-rhamnose); Een typisch bestanddeel van glycoproteïnen is ook neuraminezuur (siaalzuur).

Bepaling van het hexosegehalte . De meest nauwkeurige methode wordt beschouwd als een methode waarbij gebruik wordt gemaakt van een kleurreactie met orcinol of resorcinol, gevolgd door colorimetrie van de gekleurde oplossing en berekening met behulp van een kalibratiekromme. De concentratie van hexosen neemt vooral sterk toe bij maximale activiteit van het ontstekingsproces.

Bepaling van het fructosegehalte. Om dit te doen, wordt een reactie gebruikt waarbij cysteïnehydrochloride wordt toegevoegd aan het product van de interactie van het glycoproteïne met zwavelzuur (Dichet-methode). Het normale fructosegehalte is 0,09 ± 0,01 g/l.

Bepaling van het siaalzuurgehalte. Tijdens de periode van maximale activiteit van het ontstekingsproces bij patiënten met reumatische bloedziekten neemt het gehalte aan siaalzuren toe, wat meestal wordt bepaald door de Hess-methode (reactie). Deze reactie is gebaseerd op de vorming van een gekleurd product van de combinatie van siaalzuren, afgesplitst van serumglycoproteïnen met een azijnzwavelreagens, bepaald met behulp van daaropvolgende colorimetrie van een oplossing (gekleurd). Het normale gehalte aan siaalzuren bedraagt ​​0,6 ± 0,02 g/l.

Bepaling van het fibrinogeengehalte. Bij maximale activiteit van het ontstekingsproces bij patiënten met reumatische aandoeningen kan het fibrinogeengehalte in het bloed toenemen, wat bij gezonde mensen gewoonlijk niet hoger is dan 4,0 ± 0,03 g/l. Het fibrinogeengehalte wordt bepaald via de gravimetrische methode, waarbij het uit bloedplasma geïsoleerde stolsel wordt gewogen, of via de enzymatische methode volgens Bidwell.

Bepaling van C-reactief eiwit. Bij reumatische aandoeningen verschijnt C-reactief eiwit in het bloedserum van patiënten, dat afwezig is in het bloed van gezonde mensen. Het kreeg deze naam vanwege zijn vermogen om een ​​precipitatiereactie aan te gaan met de C-disaccharide van pneumokokken. Tijdens elektroforese beweegt het met (32-globulinen). De aanwezigheid ervan in het bloed wordt bepaald door de Andersen en McCarthy-methode door precipitatiereactie met specifiek immuunserum. Opgemerkt moet worden dat de detectie van C-reactief proteïne ook geen specifieke diagnose is. teken van reumatische ziekte, omdat deze kan voorkomen in het bloed van patiënten met longontsteking, streptokokken- en stafylokokkeninfecties, met een hartinfarct. Bij reumatoïde artritis en systemische lupus erythematosus kan reumatoïde factor, een immunoglobuline van klasse M, worden aangetroffen in de klasse M. bloed van patiënten Het is nu bewezen dat klasse-immunoglobulinen ook in het bloed van deze patiënten voorkomen, dus het zou juister zijn om over reumatoïde factoren te spreken.

Bepaling van de reumafactor. De reumatoïde factor wordt bepaald met behulp van de latextest, waarbij het serum van de patiënt wordt onderzocht in een agglutinatiereactie met menselijk γ-globuline geadsorbeerd op latexdeeltjes, of de Waaler-Rose-reactie, waarbij γ-globuline van konijn wordt geadsorbeerd op rode bloedcellen van schapen. Er wordt rekening gehouden met de resultaten op basis van de maximale serumverdunning (titer) waarbij reumafactor nog kan worden gedetecteerd. Bij gezonde mensen bedraagt ​​de maximale titer niet meer dan 1:64. De detectie van de reumafactor heeft slechts een relatieve diagnostische waarde, omdat deze kan worden gedetecteerd bij een aantal andere ziekten, zoals hepatitis, syfilis, tuberculose en tumoren.

Bepaling van de lupusfactor. In het bloed, beenmergpunctaten en exsudaat van patiënten met systemische lupus erythematosus kan lupusfactor (LE-cellen van lupus erythematosus) worden gedetecteerd, waarvan de oorsprong als volgt wordt verklaard. Door de aanwezigheid van de LE-globulinefactor in het bloedserum van patiënten zwellen de kernen van bloedcellen en weefsels op, verliest chromatine zijn structuur en verandert in een amorfe massa. Dit is al een lichaamsvreemd materiaal en wordt daarom door leukocyten gefagocyteerd. LE-cellen worden microscopisch gevonden; het zijn meestal neutrofiele leukocyten, waarvan het cytoplasma een of meer homogene, roodachtig-paarse (azur-eosinekleuring) formaties bevat. Je kunt ook vrijliggende lichamen zien, waarvan de kleur en structuur identiek zijn aan die in de cellen. Je kunt ook lupuslichaampjes vinden omringd door neutrofielen, de zogenaamde rozetten. LE-cellen moeten worden onderscheiden van Tart-cellen, dit zijn neutrofiele leukocyten die restanten van de kern hebben geabsorbeerd met behouden chromatinenetwerkcontouren. Om te zoeken naar LE-cellen wordt een hoge concentratie leukocyten bereikt in uitstrijkjes, die vervolgens volgens Romanovsky worden gekleurd. De detectiefrequentie van LE-cellen bij patiënten met systemische lupus erythematosus varieert van 40 tot 95%. Het LE-fenomeen kan, hoewel veel minder vaak, worden waargenomen bij ernstige leverschade en acute leukemie, maar bij deze ziekten worden LE-cellen niet consistent gedetecteerd en zijn ze zeldzaam.

Anginucleaire reacties. Onlangs heeft de studie van antinucleaire reacties diagnostische betekenis gekregen, waarbij de belangrijkste plaats wordt ingenomen door de bepaling van antilichamen tegen DNA, deoxyribonucleotide en celkernen. Deze onderzoeken worden uitgevoerd met behulp van immunofluorescentie.

Algemene bloedanalyse. Bloedonderzoek bij patiënten met systemische bindweefselziekten laat een toename van de ESR en soms neutrofiele leukocytose zien. Meestal treden deze veranderingen op bij reuma in het stadium van maximale activiteit. Bij systemische lupus erythematosus kan leukopenie ook worden waargenomen met een verschuiving van het aantal leukocyten naar links, tot aan de myelocyten. Bij langdurige en voortdurend recidiverende vormen van reuma wordt bij patiënten een hypo- of normochrome anemie vastgesteld. Bloedarmoede komt ook voor bij reumatoïde artritis en systemische lupus erythematosus.

Immunologische tests. Veranderingen in immunologische tests voor diffuse bindweefselziekten, naast de eerder beschreven, omvatten een verhoging van de titers van antistreptokokkenantilichamen (antistreptohyaluronidase en antistreptokinase meer dan 1:300, antistreptolysine meer dan 1:250). Een verhoging van de titers van antistreptokokkenantilichamen wordt een bijzonder ernstige indicator bij afwezigheid van infectiehaarden in het lichaam en bij zeer hoge titers (1:1500 en hoger). Soms kan het niveau van streptokokkenantilichamen bij reuma normaal blijven.

GLYCOPROTEÏDEN (glycoproteïnen) - biopolymeren bestaande uit covalent gekoppelde peptide- (eiwit)- en koolhydraatcomponenten. In gevallen waarin het koolhydraatgedeelte van het glucosemolecuul bestaat uit een of meer glucoseresiduen, wordt glucose glucoproteïnen genoemd. G. worden aangetroffen in het lichaam van dieren, bacteriën en planten en vormen de meest uitgebreide en best bestudeerde klasse van koolhydraatbevattende verbindingen. G. maken deel uit van het celmembraan en circuleren in de bloedbaan als transportmoleculen - bijvoorbeeld transferrine, ceruloplasmine (zie Bloed). Glycoproteïnen omvatten enkele hormonen, enzymen en immunoglobulinen. Een van de eerste aannames over waarom eiwitten een koolhydraatcomponent nodig hebben, werd gemaakt door E.H. Eylar (1965). Bij onderzoek van een vrij groot aantal G. ontdekte hij dat ze zich allemaal buiten de cel bevonden, in de bloedbaan, het speeksel, de melk en andere afscheidingen. Op basis van dit feit stelde hij een hypothese voor volgens welke de koolhydraatcomponent een soort pass is, waarna het eiwitmolecuul noodzakelijkerwijs de cel moet verlaten. Vervolgens werden echter gegevens verkregen die erop wezen dat veel intracellulaire eiwitten G. zijn en deel uitmaken van verschillende intracellulaire membranen en het cytoplasmatische membraan. Bovendien werden niet-geglycosyleerde eiwitten (albumine, a-lactalbumine, chymotrypsinogeen, enz.) aangetroffen in verschillende secreties en bloedserum. De hypothese van Eulard kan dus geen universele oplossing claimen voor de vraag naar de rol van de koolhydraatcomponent. In verdere studies werd ontdekt dat als siaalzuur enzymatisch wordt afgesplitst van het koolhydraatgedeelte van een aantal serumeiwitten (ceruloplasmine, haptoglobine, fetuin, orosomucoïde), de halfwaardetijd van deze asialoglycoproteïnen zal worden verkort van enkele tientallen uren. tot enkele minuten. In dit geval binden al deze asialoglycoproteïnen zich aan de membranen van parenchymale levercellen.

Een aantal glycoproteïnehormonen (bijvoorbeeld gonadotrope en follikelstimulerende hormonen) verdwijnen na verwijdering van siaalzuren zeer snel uit de bloedbaan en komen net als serum G. in de levercellen terecht. Als gevolg hiervan bindt het hormoon zich niet aan doelcellen en wordt het biologische effect ervan sterk verminderd.

Biochemische methoden voor het bepalen van glycoproteïnen

In bio, vloeistoffen, bloed en urine zit een mengsel van verschillende G's. Het isoleren van elk van deze in zijn pure vorm vereist een complexe techniek die veel tijd in beslag neemt, waardoor het moeilijk is om ze voor serieel onderzoek te gebruiken. Daarom is in de praktijk de meest voorkomende wiggen de samenvattende definitie van G. volgens een van de componenten van het koolhydraatgedeelte - hexosen, hexosaminen, fucose, siaalzuren of door het vermogen om een ​​jodiumzuurreactie te geven - Schiff's reagens ( zie Schiff's reagens).

De meest gebruikte methoden voor het bepalen van G. kunnen in twee hoofdgroepen worden verdeeld: chemisch en elektroforetisch. Voor speciale onderzoeken worden chromatografische, polarografische en radio-immunologische methoden gebruikt.

De meeste chem. methoden zijn gebaseerd op de bepaling van het koolhydraatgedeelte van het G.-molecuul met behulp van verschillende kleurreacties op basis van de interactie van een monosacharide met zwavelzuur om een ​​furfuralderivaat te vormen (bijvoorbeeld reacties met orcine, anthron, tryptofaan, carbozol, difenylamine, resorcinol, alfa-naftol). Dergelijke reacties produceren een gekleurd product met een van de genoemde verbindingen of een aromatische stikstofbase. De hoeveelheid van het resulterende gekleurde product wordt bepaald met behulp van foto-elektrocolorimetrie. De meest nauwkeurige methode voor het bepalen van hexosen is er een waarbij gebruik wordt gemaakt van een kleurreactie met orcinol of resorcinol; het meest gevoelig is de methode met alfa-naftol, die echter vaker wordt gebruikt voor indicatieve onderzoeken.

Bijna alle methoden die worden gebruikt voor de bepaling van aminosachariden zijn gebaseerd op de klassieke Elson-Morgan-methode (1933). Het principe van de methode is dat aminosuiker reageert met acetylaceton in een hete, licht alkalische oplossing. In dit geval wordt een mengsel van pyrrolen gevormd, dat een rode kleur geeft met het reagens para-dimethylaminobenzaldehyde, waarvan de intensiteit fotometrisch wordt bepaald bij 530 nm. Glucosamine geeft vrijwel dezelfde kleuring als galactosamine; bij mannosamine is de kleuring wat zwakker. Glucosaminehydrochloride wordt voornamelijk gebruikt om een ​​ijkcurve op te stellen.

Om fucose te bepalen wordt gebruik gemaakt van een reactie waarbij cysteïnehydrochloride wordt toegevoegd aan het product van de interactie van G. met zwavelzuur.

Deze reactie vormt de basis van vrijwel alle methoden die worden gebruikt voor de bepaling van methylpentosen (zie Dische-methode).

Voor de detectie en kwantitatieve bepaling van siaalzuren is een aantal methoden voorgesteld: de orcinemethode met Bial's reagens, de resorcinolmethode, de methode met thiobarbituurzuur, de difenylaminereactie en de Hess-methode (zie Hess-reactie). De meest gevoelige en specifieke is de methode met thiobarbituurzuur. G.-elektroforese werd voor het eerst geïntroduceerd door Koiw en Gronwall (E. Koiw, A. Gronwall) in 1952. Een aantal wijzigingen van deze methode worden beschreven; Een gemeenschappelijk nadeel van de meeste van hen is de relatieve complexiteit van de methode of de significante achtergrondkleuring in elektroferogrammen. Het principe van de werkwijze en techniek voor het uitvoeren van elektroforese G is hetzelfde als voor de elektroforetische scheiding van eiwitfracties van bloedserum op papier (zie Elektroforese).

Er is een aantal methoden voorgesteld om glycoproteïnefracties te identificeren; kleuring met toluïdineblauw, colloïdaal ijzer, ancianblauw, enz. De meest gebruikelijke methode voor het kleuren van glycoproteïnen is echter het Schiff-reagens, dat is gebaseerd op de reactie (jodiumzuur - fuchsinzwavelzuur), oorspronkelijk voorgesteld door R. D. Hotchkiss en Mak-Manus ( J.F.A. McManus) voor het kleuren van G. in histol, secties. Het principe van deze methode is dat de koolhydraatcomponenten van gas door jodiumoplossing worden geoxideerd tot aldehyden, en aldehyden worden gedetecteerd met behulp van Schiff's reagens. Voor kwantitatieve bepaling worden gekleurde fracties uit elektroferogrammen geëlueerd, gevolgd door fotometrie van de eluaten of bepaald met behulp van densitometrie (zie).

Bij een gezond persoon is volgens verschillende auteurs het relatieve gehalte aan G.-fracties (in%) als volgt: albumine - 10,4-16,6; alfa 1-globuline - 14,2-18,3; alfa 2-globuline - 24,8-31,8; bèta-globuline - 21,7-25,0; uglobuline - 16,0-19,2.

Het hoogste percentage koolhydraten wordt waargenomen in globulinefracties, vooral in alfa2- en bèta-globulinen (zie Globulinen).

De methode van immuno-elektroforese (zie), evenals de methode van elektroforese in polyacrylamidegel (PAGE), waarvan de resolutie 10 keer hoger kan zijn dan de resolutie van elektroforese op papier, is veelbelovend.

De resultaten van de bepaling van glycoproteïnen hebben een belangrijke differentiële diagnostische waarde voor ziekten van het bindweefsel, het cardiovasculaire systeem en het maagdarmkanaal. darmkanaal, lever, nieren, longen. Tegelijkertijd is de studie van veranderingen in het gehalte van deze stoffen in bloedserum en andere biol, vloeistoffen naast wedge-gegevens van groot belang voor het beoordelen van het verloop van de patol, het proces, de effectiviteit van de behandeling en voor de prognose. . Bij ontstekingsprocessen - acute reuma, tuberculose, longontsteking, pleuritis, is er een toename van het gehalte aan alle G.-fracties in het bloedserum, vooral alfa 1 - en alfa 2 - globulinen. De bepaling van het absolute en relatieve gehalte aan G. in bloedserum is bij reuma van het grootste belang. De concentratie van G. in het bloedserum neemt ook toe bij glomerulonefritis, tumoren, necrose en vaak bij diabetes.

Histochemische methoden voor het bepalen van glycoproteïnen in weefsels

Histochemische methoden voor het detecteren van G. zijn gebaseerd op het identificeren van hun reactieve groepen, zoals 1,2-glycolgroepen, evenals carboxylgroepen van siaalzuren. Om G. te fixeren, kunt u 10% formaline-oplossing gebruiken bij een temperatuur van 0 tot 4°C gedurende 24-48 uur. Er zijn fixatiemethoden met de toevoeging van bepaalde zouten aan formaldehyde, evenals verschillende kationische detergentia (zie), die bijdragen aan een beter behoud van polysachariden en hun daaropvolgende histochemische differentiatie. De voorkeur gaat uit naar de methode van vriesdrogen van coupes gevolgd door inbedden in paraffine. Er bestaat een aanzienlijk aantal histochemicaliën, methoden en hun modificaties voor het identificeren van polysachariden, maar ze zijn niet allemaal voldoende betrouwbaar en praktisch toegankelijk. De meest betrouwbare met het verplichte gebruik van controlereacties en gerechtvaardigd vanuit chemisch oogpunt is de McManus-Hotchkiss-Shabadash-methode. In laboratoria in ons land wordt de modificatie van Shabadash het vaakst gebruikt. De methode is gebaseerd op de oxidatie van 1,2-glycolgroepen van polysachariden met jodiumzout, gevolgd door de identificatie van fuchsinzwavelaldehyden verkregen als resultaat van de reactie (Schiff's reagens). In gebieden waar muco- en glycoproteïnen gelokaliseerd zijn, ontstaat een violetrode kleur met variërende intensiteit. Naast deze verbindingen onthult de reactie ook glycogeen, glycolipiden en vrije aldehyden. Niet-specifieke aldehyden kunnen ook verschijnen als gevolg van de oxidatie van verbindingen met onverzadigde bindingen tijdens fixatie van het materiaal met formaldehyde. Om betrouwbare resultaten te verkrijgen is daarom een ​​zorgvuldige histochemische controle noodzakelijk: allereerst is het noodzakelijk om de aanwezigheid van vrije en niet-specifieke aldehyden uit te sluiten en, als ze aanwezig zijn, een reactie uit te voeren om ze te blokkeren. Door moutdiastase te gebruiken (als laatste redmiddel speekselamylase) kan de aanwezigheid van glycogeen worden geëlimineerd.

Benodigde reagentia: kristallijne basische fuchsine (of zogenaamde basische fuchsine voor fuchsinzwavelzuur), 1 N. HCl, kalium- of natriummetabisulfiet (K 2 S 2 O 5 of Na 2 S 2 O 5), perjoodzuur of beter het kaliumzout ervan (KIO 4), sterk gezuiverde moutdiastase, hydroxylaminehydrochloride. Voor de acetyleringsreactie: watervrij pyridine en azijnzuuranhydride, 0,1 N. bijtende potas (KOH), een neuraminidasepreparaat. Lipiden worden verwijderd door behandeling met verschillende oplosmiddelen (bijvoorbeeld een heet mengsel van chloroform en methylalcohol).

Vooruitgang van vastberadenheid. Seriële secties, experimenteel en controle, worden behandeld met kaliumperjodaatoplossing, snel gewassen in gedestilleerd water en in Schiff's reagens geplaatst, vervolgens gewassen in vers bereide bisulfietoplossing (10 ml 10% kaliummetabisulfietoplossing, 10 ml 1 N. HCl en 200 ml gedestilleerd water). De coupes worden grondig gewassen in een grote hoeveelheid water, gedehydrateerd in alcoholen, geklaard in xyleen en in neutrale Canadese balsem geplaatst.

De acetyleringsreactie van glycolgroepen en het gebruik van neuraminidase bevestigen de betrouwbaarheid van de verkregen resultaten.

Bibliografie Anasashvili A. Ts. Glycoproteïnen van bloedserum en urine, M., 1968, bibliogr.; Vidershchin G. Ya Koolhydraatbevattende verbindingen, hun biosynthese en rol in de dierlijke cel, Mol lek. biol., deel 10, nr. 5, p. 957, 1976, bibliogr.; Glycoproteïnen, uitg. A. Gottschalk, vert. uit het Engels, deel 1 - 2, M., 1969; Derevitskaya V.A. Chemie van glycoproteïnen, Usp. bio. chem. bewerkt door B.N. Stepanenko, vol. 168, M., 1967; Richtlijnen voor het gebruik van uniforme klinische laboratoriumonderzoeksmethoden, red. VV Menshikova, M., 1973; Pierce E. Histochemie, vert. uit het Engels, blz. 741 en anderen, M., 1962; Principes en methoden van histocytchemische analyse in de pathologie, red. A.P. Avtsina et al., p. 7, L., 1971; Spiro R.G. Glycoproteïnen, Advanc. Protein Chem., V. 27, p. 349, 1973, bibliogr.

G. Ya. A. Ts Anasashvili (met. onderzoek), R. A. Simakova (hist.).

Stuur uw goede werk naar de kennisbank is eenvoudig. Gebruik onderstaand formulier

Studenten, promovendi en jonge wetenschappers die de kennisbasis gebruiken in hun studie en werk zullen je zeer dankbaar zijn.

Geplaatst op http://www.allbest.ru/

FEDERALE STAATSBEGROTING ONDERWIJSINSTELLING

HOGER PROFESSIONEEL ONDERWIJS

"IZHEVSK STAAT LANDBOUW ACADEMIE"

FACULTEIT DIERGENEESKUNDE

Afdeling Scheikunde

Test

in de biochemie van dieren

Onderwerp: "Totaal serumeiwit. Bepalingsmethoden, klinische en diagnostische betekenis, soortkenmerken"

Aangevuld door: Kurochkina V.S.

3e jaars student van de Faculteit Educatie

Specialiteit: "Veterinair"

Gecontroleerd: k.b. Sc., universitair hoofddocent

Berestov D.S.

Izjevsk 2013

Invoering

Sollicitatie

Invoering

In levende cellen vindt de synthese van veel organische moleculen plaats, waarvan de hoofdrol wordt gespeeld door polymeermacromoleculen - eiwitten, nucleïnezuren, polysachariden. Eiwitten spelen een bijzondere rol in het leven van levende organismen. Van ouders op kinderen wordt genetische informatie over de specifieke structuur en functies van alle eiwitten van een bepaald organisme overgedragen. Gesynthetiseerde eiwitten vervullen transport-, beschermende en structurele functies, nemen deel aan de overdracht van signalen van de ene cel naar de andere en implementeren op dezelfde manier erfelijke informatie.

Eekhoorns- organische stikstofhoudende verbindingen met een hoog molecuulgewicht, bestaande uit meer dan 20 soorten alfa-aminozuren. De conventionele grens tussen grote polypeptiden en eiwitten is het molecuulgewicht van 8000-10.000. Plasma-eiwitten worden voornamelijk gesynthetiseerd in de lever, plasmacellen, lymfeklieren, milt en beenmerg.

1. Totaal eiwit in serum

Serumeiwitten vormen een vrij grote groep eiwitten die qua structuur, fysisch-chemische eigenschappen en functies verschillen. Hun totale hoeveelheid wordt bepaald met behulp van een refractometer of de biureetmethode, en de afzonderlijke componenten worden bepaald door elektroforese. Afhankelijk van de distributiemethode kunt u 5 tot 100 eiwitfracties verkrijgen. Elektroforese op papier in bloedserum bepaalt 4-5 fracties: albumine, alfa (soms alfa-1 en alfa-2), bèta- en gamma-globulinen, en door elektroforese in agar-, zetmeel- en polyacrylamidegels - veel meer (tot 30) .

De hoeveelheid totaal eiwit en de verhouding tussen individuele fracties in het bloedserum van dieren van verschillende soorten varieert binnen bepaalde grenzen.

Bij jonge dieren is het totale eiwitgehalte lager dan bij volwassenen: bij kalveren van 1-10 dagen oud - 56-70 g/l, pasgeboren biggen - 45-50, lammeren - 46-54 g/l, zie bijlage (Tabel 1 ).

Dierlijk bloedplasma is een vloeistof met een dichtheid van 1,02 - 1,06. Een toename van de bloeddichtheid wordt waargenomen wanneer het lichaam uitgedroogd is. Het droge residu van plasma is goed voor minder dan 10% en de rest is water. Het grootste deel van het droge residu bestaat uit eiwitten, waarvan de totale concentratie in plasma 60-80 g/l bedraagt. De som van de concentraties van albuminen en globulinen is de concentratie van het totale plasma-eiwit.

Totale proteïne is een organisch polymeer bestaande uit aminozuren. Verschillende eiwitten nemen deel aan alle biochemische reacties van ons lichaam als katalysatoren, transporteren verschillende stoffen en medicijnen, nemen deel aan de immuunafweer, enz.

De totale concentratie eiwitten die in bloedserum wordt aangetroffen, wordt bepaald door het concept van “totaal eiwit”.

Totale proteïne-- het belangrijkste onderdeel van het eiwitmetabolisme in het lichaam, het is ook de totale concentratie albumine en globulinen die in het bloedserum wordt aangetroffen.

In het lichaam vervult totaal eiwit de volgende functies:

Neemt deel aan de bloedstolling;

Handhaaft een constante pH van het bloed;

(overdracht van vetten, bilirubine, steroïde hormonen naar weefsels en organen) transportfunctie;

Neemt deel aan immuunreacties en vele andere functies;

Ze zijn een reserve aan aminozuren;

Ze vervullen een regulerende functie in het lichaam, omdat ze deel uitmaken van hormonen en enzymen.

Wanneer het lichaam uitgedroogd is, neemt de concentratie van het totale plasma-eiwit toe. Een afname van de concentratie van totaal bloedplasma-eiwit kan het gevolg zijn van verschillende redenen: laag eiwitgehalte in de voeding, nierziekte, leverziekte, waarbij eiwit verloren gaat in de urine, verstoring van de opname van voedingsstoffen in de spijsverteringskanaal.

De fysiologische functie van plasma-eiwitten is het handhaven van de colloïd-osmotische druk, de buffercapaciteit van plasma en in sommige gevallen de afzetting (opslag) van lipidemoleculen, metabolische producten, hormonen, medicijnen en micro-elementen. Sommige plasma-eiwitten vervullen een enzymatische functie, terwijl immunoglobulinen voor humorale immuniteit zorgen. Complementcomponenten en C-reactief eiwit zijn belangrijk voor de implementatie van niet-specifieke resistentie, vooral in het geval van bacteriële infecties. Het evenwicht tussen stollingsfactoren en remmers zorgt voor de vloeibare toestand van het bloed onder normale omstandigheden en een snelle stolling in geval van letsel.

Classificatie:

Eenvoudig (eiwitten) (bevat alleen aminozuren)

Complex (eiwitten) (aminozuren en niet-aminozuurcomponenten (heem, vitaminederivaten, lipiden of koolhydraten)

Fibrillar (componenten van veel dichte weefsels)

Bolvormig (albumine (4-5%), globulinen (2-3%), fibrinogeen (0,2-0,4%)

2. Bepalingsmethoden, klinische en diagnostische betekenis, specifieke kenmerken

Methoden voor het bepalen van het totale eiwitgehalte in bloedserum:

1. Stikstofmetriek;

2. Bepaling van het soortelijk gewicht van wei;

3. Gravimetrisch (gravimetrisch), waarbij bloedeiwitten worden neergeslagen, gedroogd tot een constant gewicht en gewogen op een analytische balans;

4. Refractometrisch;

5. Colorimetrisch;

6. Neflometrisch;

7. Polarimetrisch;

8. Spectrometrisch;

1. Refractometer IRF - 454 B2M

bedoeld voor het bepalen van eiwitten in bloedserum, hersenvocht, het monitoren van medicijnconcentraties en het meten van de urinedichtheid. totaal eiwit bloeddier

2. Cobas Integra - Totaal Eiwit Gen.2

Testprincipe: Bivalent koper reageert in een alkalische oplossing met eiwitpeptidebindingen en vormt het karakteristieke paars gekleurde biureetcomplex.

3. Bepaling van eiwitfracties van bloedserum door elektroforese op celluloseacetaatfilm.

De bufferoplossing is bedoeld voor de elektroforetische scheiding van serumeiwitten op celluloseacetaatmembranen met daaropvolgende densitometrische bepaling van eiwitfracties.

Principes van de methode

Het principe van elektroforetische scheiding van eiwitten is gebaseerd op de verschillende bewegingssnelheden van bloedserumeiwitmoleculen in een constant elektrisch veld van een bepaalde sterkte. De gescheiden eiwitfracties worden gekleurd met een kleurstof. De kleurintensiteit van eiwitfracties is evenredig met hun hoeveelheid.

Geanalyseerde monsters

Serum vrij van hemolyse, lipemie en niet-icterisch. Eiwitfracties van bloedserum zijn stabiel in een goed gesloten buis bij 18-25 gedurende 8 uur, bij 2-8 gedurende 3 dagen, bij 20 gedurende 1 maand.

Analyse uitvoeren

1. Het uitvoeren van elektroforese

1.1. Plaats droge membranen voorzichtig op het oppervlak van de elektroforesebuffer, vermijd snelle onderdompeling, en laat ze staan ​​totdat ze volledig bevochtigd zijn. Dep de bevochtigde membranen voorzichtig tussen vellen dik filtreerpapier, zodat ze niet uitdrogen. Voordat monsters worden aangebracht, is het raadzaam een ​​preforesefase uit te voeren. Om dit te doen, moet het membraan in de elektroforesekamer worden geplaatst en moet de stroom gedurende 10 minuten in de geselecteerde modus worden ingeschakeld. De preforesefase kan worden vervangen door het membraan langdurig in een bufferoplossing te laten weken (enkele uren).

1.2. Breng met behulp van een applicator de geanalyseerde bloedserummonsters aan op een afstand van 2-3 cm van de kathoderand van het membraan. Plaats het membraan in een elektroforetische kamer en sluit de stroom aan.

2. Elektroferogramverwerking

2.1. kleurstof Crimson S.

Nadat u de stroom hebt uitgeschakeld, brengt u het membraan voorzichtig gedurende 3-5 minuten over in de kleurstofoplossing en vervolgens tweemaal gedurende 3 minuten in een 5-7% azijnzuuroplossing (totdat de achtergrond is gebleekt).

1.2. verwerk het elektroferogram met behulp van een scanner en een computerprogramma.

4. Thymol-test

Principe van de methode

Serum-bèta-globulinen, gamma-globulinen en lipoproteïnen worden bij pH 7,55 met thymolreagens neergeslagen. Afhankelijk van de hoeveelheid en onderlinge verhouding van eiwitfracties treedt tijdens de reactie troebelheid op, waarvan de intensiteit turbidimetrisch wordt gemeten.

Klinische en diagnostische waarde:

De thymoltest is geschikter voor functionele onderzoeken van de lever dan colloïdresistente tests. Er wordt aangenomen dat het positief is in 90-100% van de gevallen van de ziekte van Botkin (al in het pre-icterische stadium en in de anicterische vorm) en bij toxische hepatitis. De reactie is positief bij post-hepatitis en post-necrotische, vooral icterische cirrose (in tegenstelling tot andere vormen van cirrose), collageenziekten, malaria en virale infecties. Bij obstructieve geelzucht is deze negatief (in 75% van de gevallen), wat een differentiële diagnostische betekenis heeft.

Bij obstructieve geelzucht wordt de test alleen positief als het proces wordt gecompliceerd door parenchymale hepatitis. Om obstructieve geelzucht te onderscheiden van parenchymale geelzucht is het gebruik van een thymoltest met een Burstein-test (voor bèta- en pre-bètalipoproteïnen) van groot belang.

Bij parenchymale geelzucht zijn beide tests positief; bij obstructieve geelzucht is de thymoltest negatief en de Burshtein-test scherp positief.

Om het totaal eiwit in het bloedserum te bepalen wordt veneus bloed van het dier afgenomen in een speciale reageerbuis met een stollingsactivator, zie bijlage (Tabel 2). Voordat bloed wordt gedoneerd, wordt het dier gedurende 8 uur op een vast dieet gehouden. Er wordt bloed gedoneerd voordat medicijnen worden ingenomen die de resultaten van het onderzoek kunnen beïnvloeden. De kwalitatieve samenstelling van bloedplasma-eiwitten is zeer divers. Het totale eiwit wordt door elektroforese in afzonderlijke fracties verdeeld, wat gebaseerd is op de scheiding van eiwitmengsels op basis van verschillende massa's en de specifieke lading van één eiwit. Tijdens elektroforetische scheiding is, afhankelijk van de drager, het aantal eiwitfracties van het totale eiwit niet hetzelfde. Door elektroforese op papier wordt een kleiner aantal fracties verkregen, namelijk 5 fracties, terwijl bij elektroforese op een agargel of polyacrylamidegel het aantal eiwitfracties aanzienlijk groter kan zijn, tot wel 20 fracties. De belangrijkste facties omvatten albuminen en globulinen.

Albumine gesynthetiseerd in de lever en zijn eenvoudige eiwitten die maximaal 6 aminozuurresiduen bevatten. Ze zijn zeer oplosbaar in water. De genormaliseerde waarde is 56,5 - 66,8 (Albumine in het bloedserum is verantwoordelijk voor ongeveer 60% van het totale eiwit. Albuminen worden gesynthetiseerd in de lever (ongeveer 15 g / dag), hun halfwaardetijd is ongeveer 17 dagen. De oncotische druk van plasma is voor 65-80% te danken aan albumine. Albuminen vervullen een belangrijke functie bij het transporteren van veel biologisch actieve stoffen, met name hormonen. Ze kunnen zich binden met cholesterol; bilirubine is ook in verband gebracht met albumine.

Albumine functie:

Handhaving van de colloïdosmotische druk in het plasma:

Constantheid van de waterstofionenconcentratie;

Transport van verschillende stoffen (bilirubine, vetzuren, minerale verbindingen en medicijnen).

Bloedplasma-albuminen kunnen ook worden beschouwd als een bepaalde reserve aan aminozuren voor de synthese van vitale specifieke eiwitten in omstandigheden van eiwittekort in de voeding. Albumine houdt water vast in de bloedbaan. Bij nefritis dringen albuminen als eerste vanuit het bloedplasma de urine binnen, als eiwitten met het laagste molecuulgewicht (het molecuulgewicht van albuminen is ongeveer 60.000 - 66.000). Normaal gesproken is albumine verantwoordelijk voor 35-55% van de totale hoeveelheid bloedplasma-eiwitten.

Plasmaglobulinen zijn veel verschillende eiwitten. Tijdens elektroforese bewegen ze zich achter de albuminen aan. De relatie met lipiden zorgt ervoor dat het globulinecomplex een oplosbare toestand krijgt en naar verschillende weefsels wordt getransporteerd. Op basis van elektroforetische mobiliteit worden globulines onderverdeeld in b2-, b1-, c- en g-globulinen. (b- en c-globulinen worden gesynthetiseerd in de lever en zijn actieve dragers van verschillende bloedsubstanties). Tijdens de periode van intensieve groei van het dier in het bloed is er een relatieve afname van het albumineniveau en een overeenkomstige toename van het niveau van b- en g-globulinen. B-globulines hebben een actieve interactie met bloedlipiden. G-globulinen, de minst mobiele en zwaarste fractie van alle globulinen, worden gesynthetiseerd door B-lymfocyten die afkomstig zijn uit een deel van de beenmergstamcellen of daaruit gevormde plasmacellen. Ze vervullen een beschermende functie, namelijk beschermende antilichamen (immunoglobulinen). Bij vogels zijn drie klassen immunoglobulinen onderzocht: IgG, IgM, IgA, bij zoogdieren zijn er vijf: IgG, IgM, IgE, IgD. IgA. Kwantitatief overheerst IgG in het bloed (80%). Met behulp van de immuno-elektroforesemethode worden tot 30 eiwitfracties geïsoleerd in bloedserum. Alle immunoglobulinen bestaan ​​uit twee zware polypeptideketens (MW 53.000-75.000) en twee lichte ketens (MW 22.500), verbonden door drie disulfidebruggen. Elk type immunoglobuline kan specifiek interageren met slechts één specifiek antigeen.

Het bloedserum van pasgeboren kalveren, lammeren, geiten, biggen en veulens bevat vrijwel geen antistoffen. Pasgeboren dieren zijn in de eerste levensdagen niet in staat antilichamen te synthetiseren. Ze verschijnen pas nadat het colostrum het maag-darmkanaal is binnengekomen. Onafhankelijke synthese van deze beschermende eiwitten in het beenmerg, de milt en de lymfeklieren wordt waargenomen vanaf de leeftijd van 3 of 4 weken van het dier. Daarom is het belangrijk om de pasgeborene te voeden met colostrum, dat 10-20 keer meer immunoglobulinen bevat dan gewone melk. Colostrum-immunoglobulinen kunnen via pinocytose de darmwand binnendringen zonder te splitsen en in het bloed terechtkomen, waardoor de verdediging van het lichaam ontstaat (colostrale of colostrale immuniteit).

T-lymfocyten werken samen met B-lymfocyten bij de synthese van immunoglobulinen, remmen immunologische reacties en lyseren verschillende cellen. In het bloed vormen T-lymfocyten 70%, B-lymfocyten - ongeveer 30%. Voor de synthese van immunoglobulinen is ook een derde celpopulatie nodig: macrofagen. Ze fungeren als primaire factoren van niet-specifieke bescherming, vanwege het vermogen om micro-organismen, antigenen en immuuncomplexen te vangen en te verteren, en informatie daarover door te geven aan T- en B-lymfocyten. Macrofagen fungeren als tussenpersonen tussen alle deelnemers aan het proces met behulp van door cellen geproduceerde lymfokinen en monokinen.

B-lymfocyten vormen alleen antilichamen als reactie op bepaalde antigenen die het lichaam binnendringen (bacteriën, virussen). Terwijl we hierop wachten, moeten de structuur van het antigeen en de globulinereceptor op het oppervlak van de lymfocyt met elkaar overeenkomen, als een sleutel tot een slot.

De concentratie van g-globulinen neemt toe in het bloedserum tijdens chronische infectieziekten, tijdens immunisaties en zwangerschappen van dieren.

Een aantal bloedplasma-eiwitten vervullen specifieke functies. Onder hen moeten eiwitten zoals transferrine, haptoglobine, ceruloplasmine, properdin, het complementsysteem, lysozym en interferon worden benadrukt.

Transferrines zijn β-globulinen die in de lever worden gesynthetiseerd. Door twee ijzeratomen per eiwitmolecuul te binden, transporteren ze dit element naar verschillende weefsels, reguleren ze de concentratie ervan en houden ze het vast in het lichaam. Op basis van de lading van het eiwitmolecuul en de aminozuursamenstelling worden 19 soorten transferrines onderscheiden, die geassocieerd zijn met erfelijkheid. Transferrines kunnen ook een direct bacteriologisch effect hebben. De concentratie transferrines in het bloedserum bedraagt ​​ongeveer 2,9 g/l. Lage niveaus van transferrines in het bloedserum kunnen worden veroorzaakt door een tekort aan eiwitten in de voeding van het dier.

Haptoglobine maakt deel uit van b2-globuline, wordt gesynthetiseerd in de lever en bevat koper (0,3%). Door koper te binden, zorgt ceruloplasmine voor het juiste niveau van dit micro-element in de weefsels. Ceruloplasmine is goed voor 3% van de totale hoeveelheid koper in het lichaam van het dier. Het manifesteert zich als een enzym en als een oxidatiemiddel. Ceruloplasmine is een oxidase van adrenaline en ascorbinezuur. Een belangrijk kenmerk van ceruloplasmine is het vermogen ervan om ijzer in weefsels te oxideren tot Fe3+ en het in deze vorm af te zetten.

Het complementsysteem is een complex van serumeiwitten van globuline-aard, dat wordt beschouwd als een systeem van pro-enzymen, waarvan de activering leidt tot cytolyse, de vernietiging van het antigeen. De synthese van het complementsysteem, dat tot 25 verschillende eiwitten telt, wordt voornamelijk uitgevoerd door mononucleaire fagocyten, evenals door histiocyten. Dit complexe effectorsysteem van serumeiwitten, dat een belangrijke rol speelt bij het reguleren van de immuunrespons en het handhaven van de homeostase, ontstond eerder dan het immuunsysteem in termen van fylo- en ontogenese. Er zijn 11 componenten van het complementsysteem die in detail zijn bestudeerd. De cascade van enzymatische reacties die wordt veroorzaakt door het antigeen-antilichaamcomplex en leidt tot de opeenvolgende activering van alle componenten van de component, te beginnen met de eerste, wordt de klassieke activeringsroute genoemd. De bypass-route, die wordt gekenmerkt door de activering van latere complementcomponenten, beginnend met C3, wordt alternatief genoemd. De vernietiging van de microbiële cel vindt pas plaats na de activering van de C4-component. Terminale eiwitten van het complementsysteem, die achtereenvolgens met elkaar reageren, dringen de lipidedubbellaag binnen en beschadigen het celmembraan met de vorming van membraankanalen, wat leidt tot osmotische stoornissen, penetratie van antilichamen en complement in de cel, gevolgd door lyse van intracellulaire cellen. membranen. Het wordt algemeen aanvaard dat het complementgehalte in bloedserum een ​​van de meest objectieve indicatoren is van de staat van de niet-specifieke afweer van het lichaam.

Properdin is een glycoproteïne van het g-globulinetype met een molecuulgewicht van ongeveer 184.000. Het maakt 0,3% uit van de totale hoeveelheid serumeiwitten. Het bezit een hoge thermolabiliteit en wordt bij 56°C in 30 minuten vernietigd. De plaats van synthese van properdine is niet volledig opgehelderd. Het is waarschijnlijk dat lymfoïde weefsel deelneemt aan de synthese ervan. Properdin vertoont voornamelijk een bacteriedodend effect tegen gramnegatieve microben. Om de activiteit van properdine te laten plaatsvinden, is de aanwezigheid van de eerste vier complementcomponenten en magnesiumionen die overeenkomen met het properdinesysteem vereist. Er is een verband aangetoond tussen het niveau van het juiste systeem en de mate van weerstand van het lichaam van het dier.

Interferon is een laagmoleculair eiwit (MW 24.000-36.000), dat door weefselcellen wordt gesynthetiseerd en uitgescheiden als reactie op de penetratie van virussen daarin. Interferon dringt gemakkelijk vanuit de cellen in de bloedbaan en wordt door alle organen en weefsels verspreid. Nadat het virus de cel is binnengekomen, wordt enkelstrengs RNA vrijgegeven en wordt op basis daarvan dubbelstrengs RNA gesynthetiseerd. Zo wordt RNA verkregen en induceert de synthese van interferon. Interferon bindt zich aan het plasmamembraan van andere cellen in het lichaam en stimuleert hun vermogen om virale infecties te weerstaan. Het antivirale effect van interferon houdt verband met het vermogen ervan om in cellen de synthese van remmers en enzymen te activeren die de translatie van viraal IRNA en bijgevolg de reproductie van het virus blokkeren. Interferon heeft ook immuunregulerende eigenschappen. Er zijn drie soorten interferonen: a-interferon (leukocyt), dat antivirale en antiproliferatieve, antitumorale effecten heeft; β-interferon (fibroblast), dat voornamelijk antitumorale en antivirale effecten heeft; g-interferon (lymfocytisch of immuun), dat voornamelijk immuunmodulerende eigenschappen heeft.

De fysiologische rollen van bloedeiwitten zijn talrijk, waarvan de belangrijkste zijn:

Ze handhaven de colloïd-oncotische druk, houden het bloedvolume in stand, binden water en houden het vast, waardoor wordt voorkomen dat het de bloedbaan verlaat;

Neem deel aan bloedstollingsprocessen;

Ze handhaven een constante pH van het bloed en vormen een van de bloedbuffersystemen;

Door te combineren met een aantal stoffen (cholesterol, bilirubine, enz.), maar ook met medicijnen, brengen ze deze naar de weefsels.

Ze handhaven normale kationenniveaus in het bloed door er niet-dialyseerbare verbindingen mee te vormen (40-50% van het serumcalcium is bijvoorbeeld gebonden aan eiwitten; een aanzienlijk deel van ijzer, koper, magnesium en andere sporenelementen is ook gebonden aan eiwitten);

Speel een cruciale rol in immuunprocessen;

Dienen als reserve aan aminozuren;

Voer een regulerende functie uit (hormonen, enzymen en andere biologisch actieve eiwitstoffen).

Klinische en diagnostische waarde:

1) Normoproteïnemie - normaal totaal eiwitgehalte;

2) Hypoproteïnemie - verlaagd totaal eiwitgehalte;

3) Hyperproteïnemie - verhoogd eiwitgehalte;

Veranderingen in het totale bloedeiwit kunnen relatief en absoluut zijn.

Hyperproteïnemie:

1. Ernstige uitdroging.

2. Wanneer het bloed dikker wordt als gevolg van kleine vochtverliezen, wat gebeurt met overvloedige diarree, toegenomen zweten, oncontroleerbaar braken, diabetes insipidus, cholera, darmobstructie, gegeneraliseerde peritonitis, ernstige brandwonden, watergebrek.

3. Voor chronische polyartritis en sommige chronische ontstekingsprocessen.

4. Aanhoudende hyperproteïnemie tot 12% en hoger wordt waargenomen bij myeloom (plasmacytoom), Vandelström's macroglobulinemie, waarbij extra foci en formaties van "abnormale", pathologische eiwitten - paraproteïnen - verschijnen in de platte botten van de schedel.

Hypoproteïnemie wordt bijna altijd geassocieerd met hypoalbuminemie, en hyperproteïnemie met hyperglobulinemie.

Het lichaam compenseert hypoalbuminemie met hyperglobulinemie (zelfs als er geen irritatie van het reticulo-endotheliale systeem is) om het niveau van de colloïd-osmotische druk op peil te houden. Integendeel, de toename van globulinen wordt gecompenseerd door hypoalbuminemie.

Verduidelijking van de kwantitatieve relaties tussen individuele fracties bloedserum is van belangrijk diagnostisch belang. Hun onderzoek maakt het mogelijk ziekten te differentiëren, zelfs als het gehalte aan totaal eiwit in het serum onveranderd blijft.

Relatieve hyperproteïnemie- geassocieerd met een afname van het circulerend bloedvolume als gevolg van uitdroging.

Absolute hyperproteïnemie- waargenomen bij overmatige synthese van pathologische eiwitten, verhoogde vorming van immunoglobulinen, verhoogde synthese van eiwitten in de acute fase van ontsteking.

Naast het totale eiwitgehalte is de bepaling van eiwitfracties belangrijk voor de diagnose van verschillende pathologische processen. Schending van de optimale verhouding tussen hen wordt dysproteïnemie genoemd. De meest uitgesproken dysproteïnemie treedt op wanneer organen waar eiwitten worden gesynthetiseerd, beschadigd zijn. Vooral vaak neemt de hoeveelheid albumine af (hypoalbuminemie), die belangrijke functies vervult bij het handhaven van de colloïd-osmotische bloeddruk, het reguleren van de wateruitwisseling tussen het bloed en de interstitiële ruimte, het binden en transporteren van koolhydraten, lipiden, hormonen, vitamines en mineralen.

Een toename van de hoeveelheid albumine komt zelden voor, vooral tijdens uitdroging. Wanneer de hoeveelheid albumine verandert, wordt hun verhouding met globulinen verstoord (de verhouding albumine-globuline verandert), die bij gezonde dieren varieert van 0,7 tot 1,0 (bij honden 1,2).

De hoeveelheid alfaglobulinen neemt toe tijdens acute ontstekingsprocessen (reuma, longontsteking, glomerulonefritis, artritis) en tijdens exacerbatie van chronische ziekten (tuberculose, hepatitis), aangezien deze groep eiwitten uit de "acute fase" omvat (C-reactief eiwit, ceruloplasmine, haptoglobine, alfa-1-antitrypsine, alfa-2-macroglobuline, alfa-1-zuur glycoproteïne). Hun niveau neemt zelden af, meestal tijdens ernstige degeneratieve processen in de lever, waar alfaglobuline gedeeltelijk wordt gesynthetiseerd.

Een toename van de hoeveelheid bètaglobulinen wordt het vaakst waargenomen bij chronische infecties, nierziekten (nefrose, glomerulonefritis) en levercirrose. De samenstelling van bèta-globulinefracties omvat fibrinogeen, waarvan het gehalte toeneemt bij gevallen van lobaire pneumonie, bronchopneumonie, leukemie, septische endocarditis en afneemt bij leverziekten, waar het wordt gesynthetiseerd.

Gammaglobulinefracties bevatten het grootste deel van antilichamen (immunoglobulinen), die humorale bescherming van het lichaam bieden, dus hun hoeveelheid in het bloedserum hangt af van de morfologische volwassenheid en functionele bruikbaarheid van het immunoreactieve weefsel.

Lage niveaus van gammaglobulinen komen voor bij pasgeborenen, vooral op de eerste levensdag, omdat ze niet door de placentabarrière gaan, maar alleen met colostrum het lichaam binnenkomen (fysiologische immunodeficiëntie), waardoor bij het handhaven van hun niveau de kwaliteit van de melk wordt gehandhaafd. en de tijdigheid van het drinken zijn van groot belang voor de toestand van het slijmvlies van de dunne darm. De synthese van hun eigen immunoglobulinen begint vanaf de leeftijd van 5-7 dagen en bereikt het optimale niveau pas op de leeftijd van 6 maanden, dus jonge dieren zijn vatbaar voor vele ziekten (salmonellose, streptokokkose, pasteurellose, virale luchtweginfecties, longontsteking). Een afname van het gehalte aan gammaglobulinen wordt ook waargenomen bij verschillende ziekten die gepaard gaan met schade aan het immuunsysteem (myeloom, lymfatische leukemie, ziekte van Gumboro), verlies van immunoglobulinen tijdens nefrose, enteritis, chronische bloedingen, als gevolg van onderdrukking van de functie van het immuunsysteem door verschillende toxines, medicijnen (immunosuppressiva).

Hypoproteïnemie:

Onvoldoende inname van voedingseiwitten, meestal waargenomen bij ondervoeding, verhongering, tumoren, vernauwing van de slokdarm, disfunctie van het maag-darmkanaal (als gevolg van verslechtering van de vertering en opname van eiwitcomponenten van voedsel), bijvoorbeeld met langdurige ontstekingsprocessen van de darmen .

Volgens A.A. Pokrovsky kan zelfs een onevenwichtige aminozuursamenstelling van voedsel soms leiden tot hypoproteïnemie.

Om normale vitale processen te garanderen, gebruikt het lichaam de albuminefractie van bloedplasma-eiwitten. Bij een verhoogde consumptie van albumine (vooral verantwoordelijk voor de oncotische bloeddruk) ontstaat er zogenaamd oncotisch oedeem of hongeroedeem. Elke daling van het eiwitgehalte in het bloedplasma tot onder de 5% gaat vaak gepaard met hypoproteïnemisch weefseloedeem.

2. Verminderde eiwitbiosyntheseprocessen (chronische parenchymale hepatitis, acute en chronische ziekten, langdurige etterende processen, kwaadaardige neoplasmata, ernstige thyreotoxicose, enz.).

3. Verlies van eiwitten door het lichaam tijdens acute en chronische bloedingen, met een sterk verhoogde doorlaatbaarheid van de capillaire wanden (met hun toxische schade, wanneer bloedeiwitten in het weefsel lekken), met bloedingen, de vorming van uitgebreid exsudaat, effusies in de sereuze gaatjes, oedeem.

De afgifte van eiwitten (voornamelijk albumine) uit de bloedbaan vindt plaats wanneer het nierfilter wordt verstoord als gevolg van organische nierziekten (vooral nefrose en amyloïdose), waarbij eiwitten bijna altijd in de urine worden aangetroffen, maar ook bij brandwonden.

4. Defectoproteïnemie (albuminemie) - congenitale afwezigheid of onvoldoende ceruloplasmine in het bloedplasma bij de ziekte van Wilson.

5. Bij vrouwen tijdens de borstvoeding en de laatste maanden van de zwangerschap.

6. Nefrotisch syndroom

7. Kwashiorkor (acuut eiwittekort)

8. Zoutretentiesyndroom

Relatieve hypoproteïnemie- geassocieerd met een toename van het volume van het circulerend bloed als gevolg van water (met anurie, cardiale decompensatie, verhoogde synthese van het antidiuretisch hormoon van de hypothalamus).

Absolute hypoproteïnemie- waargenomen bij onvoldoende inname van eiwitten in het lichaam als gevolg van vasten, onvoldoende eiwitsynthese tijdens chronische ontstekingsprocessen van de lever, aangeboren aandoeningen van de synthese van individuele bloedeiwitten, verhoogde afbraak van eiwitten in het lichaam en de vorming van een aanzienlijke hoeveelheid exsudaat.

Bibliografie

1. Babenko O. O., Savchenko T.G., Reznichenko L.V. Preventie van hypovitaminose A in de varkenshouderij./ T.G. Savchenko./ Diergeneeskunde. -Nr. 12. - 2008. - P. 38 - 39.

2. Zaitsev S. Yu., Biochemie van dieren / Yu V. Konopatov - St. Petersburg: "Lan", 2004., 384 p.

3. Severina E. S., Biochemie 2e editie / E. S. Severina - M.: "Med" 2004., 184 p.

Sollicitatie

Soort dier	Totaal eiwit, g/l	Eiwitfracties, percentage
Albumine	Globulinen
Vee

Tab. 2. Biochemische parameters van bloedserum bij verschillende diersoorten

Alkalische fosfatase
Creatininekinase
Bicarbonaten
Totaal bilirubine
Chloriden (Cl-)
Cholesterol
Creatinine
Eiwitalbumine Globuline		55-75 26-40 21-37	57-80 24-38 24-47	62-82 28-39 29-49	57-79 25-38 24-46	58-83 23-40 39-60	59-78 27-37 32-50	61-75 23-36 27-44	54-83 24-46 15-28	55-70 35-44 17-35
Natrium (Na+)
Ureum

Geplaatst op Allbest.ru

...

Soortgelijke documenten

Gevormde elementen van bloed: rode bloedcellen, leukocyten, hemoglobine, hematocriet. Methode voor het berekenen van het aantal rode bloedcellen per eenheid bloedvolume in de Goryaev-kamer, bloedafnametechniek. Functies: trofisch, excretie, ademhaling, beschermend, correlatief.

praktijkwerk, toegevoegd 10/09/2009


De lever is de meest massieve klier in het lichaam van dieren en mensen. Classificatie en structurele kenmerken van de lever bij verschillende diersoorten. Bloedvoorziening en functies van de lever, beschrijving van de structuur van de leverkwab, specifieke kenmerken. De structuur van de galwegen.

samenvatting, toegevoegd op 11/10/2010


Bloedgroepen van runderen als basis van het selectieproces. Bloedgroepen testen en hun gebruik om stammen en rassen te identificeren. Het gebruik van immunogenetische monitoring en biotechnologie van embryotransplantatie bij de voortplanting.

cursuswerk, toegevoegd 08/02/2010


Bio-ecologische kenmerken en landbouwtechnologie van maïs. Technologie voor de productie van voedereiwit uit maïs. Kenmerken van eencellige micro-organismen. Apparatuur gebruikt voor de productie van voedergist. Automatisering van productieprocessen.

proefschrift, toegevoegd 14-06-2015


Moderne ideeën over het immuunsysteem en niet-specifieke weerstand van het lichaam. Beoordeling van de immuunstatus en corrigerende therapie bij de complexe behandeling van operatief zieke dieren. Soortkenmerken van het bloedimmunogram tijdens etterende ontsteking.

samenvatting, toegevoegd op 22/12/2011


Beschrijving van eiwitten, vetten, koolhydraten, vitaminen, mineralen en sporenelementen. Beoordeling van de voedingswaarde van voer. Methoden voor het bestuderen van de stofwisseling in het dierlijk lichaam, gebaseerd op de wet van behoud van energie. Balans van stikstof, koolstof en energie in de koe.

samenvatting, toegevoegd op 15-06-2014


Economische schade veroorzaakt door vliegen voor vee, middelen en methoden om hun aantallen te reguleren. Reserves van waardevolle voedereiwitten in niet-traditionele voeders en problemen met de verwijdering van vogelpoep. Teelt en gebruik van huisvliegen, de soorten ervan.

proefschrift, toegevoegd op 23-07-2010


Het systeem van organen voor de bloed- en lymfecirculatie, of het vasculaire systeem. Algemene kenmerken van de bloedtoevoer naar individuele organen. Bestanddelen van bloed en hun belangrijkste functies. Lymfatisch systeem van zoogdieren. Het verloop en de structuur van lymfevaten.

samenvatting, toegevoegd op 19-06-2014


Kenmerken van de voorbereidende werkzaamheden op de site vóór het oogsten van aardappelen: het bepalen van de algemene toestand van de gehele aanplant, de mate van ontwikkeling van de struiken, hun voorkomen van Phytophthora. Methoden voor het bepalen van de geschatte omvang van de oogst. Technologie en timing van de oogst.

artikel, toegevoegd 03/03/2010


De belangrijkste functies van bloed: trofisch (voedzaam), excretie (uitscheiding), respiratoir (ademhaling), beschermend thermoregulerend, correlatief. Bloedplasma, plasma-eiwitten, niet-eiwit-stikstofhoudende verbindingen, stikstofvrije organische stoffen.